Адипокино-цитокиновый профиль адипоцитов эпикардиальной жировой ткани при ишемической болезни сердца на фоне висцерального ожирения

Обоснование

На сегодняшний день сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) остаются основной причиной утраты трудоспособности, инвалидизации и смертности населения [1]. В 2013 г. ССЗ стали причиной смерти 17,3 млн человек, что превышает показатели 1990 г. на 40,8% [2]. Во многом это увеличение обусловлено общим старением населения, воздействием на организм человека сердечно-сосудистых факторов риска ССЗ [3]. Одним из таких факторов является ожирение. Накопление общего жира в организме происходит в результате отложения жира в подкожных и висцеральных депо [4]. Висцеральная жировая ткань (ВЖТ) окружает внутренние органы и характеризуется ассоциацией с кардиометаболическими факторами риска, независимо от общей жировой массы [5].

Большинство эктопических жировых отложений продемонстрировали тесную ассоциацию с кардиометаболическими рисками и клиническими проявлениями большинства ССЗ [6]. В ряде клинических исследований обнаружено, что избыток эпикардиального жира сопровождается снижением синтеза адипонектина, гипертрофией миокарда, фиброзом и апоптозом кардиомиоциотов, развитием желудочковых аритмий [7]. В то же время эпикардиальные адипоциты в физиологических условиях выполняют ряд важных для миокарда функций: метаболическую (абсорбируют избыток свободных жирных кислот и выступают в качестве источника энергии в условиях ишемии), термогенную, механическую, а также синтезируют адипонектин и адреномедуллин, обладающие кардиопротективными свойствами [8]. Выяснение метаболических особенностей адипоцитов эпикардиальной жировой ткани, локализованной в непосредственной близости к очагу повреждений при ишемической болезни сердца (ИБС), может иметь как теоретическое, так и практическое значение для патофизиологии и кардиологии.

Цель

Изучение адипокиново-цитокинового профиля адипоцитов эпикардиальной, подкожной жировой ткани, сыворотки крови, поиск взаимосвязи с площадью ВЖТ, биохимическими и клиническими характеристиками больных ИБС.

Методы

Дизайн исследования

В исследование включены 84 пациента (70 мужчин и 14 женщин) с ИБС в возрасте 61,9 (53,7;68,5) лет. Диагноз ИБС установлен согласно критериям ВНОК (2007). В контрольную группу были включены 30 мужчин без ССЗ, средний возраст которых 58,42 (52,2:71,1) лет. Все пациенты до начала процедур исследования подписали форму информированного согласия, одобренную Локальным этическим комитетом.

У пациентов верифицировали наличие висцерального ожирения (ВО) путем измерения площади ВЖТ и подкожной жировой ткани (ПЖТ) с помощью мультиспиральной томографии на компьютерном томографе LightspeedVCT-64 (GeneralElectric, США). При ВО площадь ВЖТ должна быть больше 130 см2, а коэффициент отношения площади висцеральной и подкожной жировой ткани (ВЖТ/ПЖТ) – больше или равен 0,4 [9]. Для оценки влияния ВО на адипокиново-цитокиновый профиль адипоцитов эпикардиальной жировой ткани (ЭЖТ) и ПЖТ пациенты были разделены на 2 группы. Для оценки влияния ВО на адипокиново-цитокиновый профиль адипоцитов ЭЖТ и ПЖТ у пациентов с площадью ВЖТ более 130 см2 проводился забор адипоцитов ЭЖТ и ПЖТ с последующим культивированием и оценкой адипокиновой и провоспалительной активности. Для поиска взаимосвязи адипокиново-цитокинового профиля адипоцитов ЭЖТ и ПЖТ с площадью ВЖТ, биохимическими и клиническими характеристиками проводился сбор анамнеза, определение показателей углеводного и липидного обменов, адипокинового и провоспалительного статусов в сыворотке крови всех исследуемых групп.

Критерии соответствия

Критерии включения: подписанное информированное согласие на комплексное обследование и лечение.

Критерии исключения: пациенты моложе 50 и старше 80 лет, наличие в анамнезе сахарного диабета; уровень гликозилированного гемоглобина (HbA1c) 6,0%; наличие тяжелой сопутствующей патологии: онкологические, инфекционные, психические заболевания, хроническая обструктивная болезнь легких, болезни соединительной ткани, почечная и гепатоцеллюлярная недостаточность.

Условия проведения

Исследование выполнено на базе ФГБНУ «Научно-исследовательский институт комплексных проблем сердечно-сосудистых заболеваний», г. Кемерово, Российская Федерация и МБУЗ «Кемеровский кардиологический диспансер» г. Кемерово, Российская Федерация.

Описание медицинского вмешательства

У всех пациентов измеряли массу тела (кг), рост (м), окружность талии (ОТ) (см), бедер ОБ (см), отношение ОТ/ОБ, расcчитывали индекс массы тела (ИМТ, кг/м2).

Адипоциты выделяли из подкожного и эпикардиального жира (в количестве 3–5 г) больных с ВО при операции аорто-коронарного шунтирования (АКШ). Образцы ЭЖТ забирали из жировых депо, локализованных преимущественно вокруг правых отделов сердца, а образцы ПЖТ – из подкожной клетчатки нижнего угла средостенной раны. Жировую ткань помещали в сбалансированный солевой раствор Хэнкса (SigmaAldrich, США) с добавлением пенициллина (100 U/L), стрептомицина (100 мг/мл), гентамицина (50 мкг/мл). Выделение изолированных адипоцитов из жировой ткани осуществляли в стерильных условиях в ламинарном шкафу II класса защиты (БОВ-001-АМС МЗМО, Россия) по методике, описанной Carswell и соавт. [10]. Для этого образцы ЭЖТ и ПЖТ (размером 1–2 мм3) инкубировали 30 мин при температуре 37°C в растворе коллагеназы (0,5 мг/мл; Invitrogen, США), содержащем 200 nM аденозина (SigmaAldrich, США). Затем добавляли равный объем 10% эмбриональной телячьей сыворотки (Gibco, США) в полной культуральной среде М 199 (Gibco, США), содержащей 1% Hepes буфер (Gibco, США), 1% раствор L-глутамина с пенициллином и стрептомицином (Gibco, США), 0,4% раствор амфотерицина-В (Gibco, США) и глюкозу в конечной концентрации 5 ммоль/л. Далее флотирующие кусочки ферментированной жировой ткани переносили в стерильный фильтр с размером пор 100 мкм (Falcon, США), в условиях мягкого перемешивания промывали полной культуральной средой М 199, объем содержимого пробирки с клетками доводили до 5 мл и центрифугировали 2 мин при 200g. Изолированные адипоциты помещали в отдельную пробирку, объем содержимого пробирки доводили культуральной средой до 1 мл и проводили подсчет адипоцитов в камере Горяева. Жизнеспособность клеток оценивали согласно методике [11]. В лунку стерильного 24-луночного планшета (Greiner, Германия) вносили адипоциты в количестве 20×105 и доводили объем содержимого лунки до 1 мл культуральной средой. Клетки культивировали в течение 2 сут с заменой среды через 1 сут. Со дна лунок аккуратно забирали среду каждые сутки культивирования для последующего определения адипокинов и цитокинов. Параллельно определяли содержание адипокинов, цитокинов, показатели липидного и углеводного обменов в сыворотке крови больных с ВО и без ВО.

Содержание лептина, его растворимого рецептора (SOB-R), адипонектина в ЭЖТ и ПЖТ определяли иммуноферментным методом с использованием тест-систем фирмы BioVendor (США) и eBioscience (Австрия). Концентрацию цитокинов – интерлейкинов-1β (ИЛ-1β), 6 (ИЛ-6), 10 (ИЛ-10), фактора некроза опухоли-α (ФНО-α) проводили с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) диагностическими наборами фирмы Monobind (США).

Концентрацию общего холестерола (ОХС), триглицеролов (ТГ), липопротеинов очень низкой, низкой и высокой плотности (ХС-ЛПОНП, ХС-ЛПНП, ХС-ЛПВП), Апо-А1 и Апо-В, содержание свободных жирных кислот (СЖК), уровня глюкозы и гликированного гемоглобина (HbA1c) в сыворотке измеряли ферментативным методом по конечной точке на автоматическом биохимическом анализаторе Konelab 30i фирмы Thermo Fisher Sientific (Финляндия). Уровень инсулина и С-пептида в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа с использованием тест-системы Monobind Insulin ELISA (США). Чувствительность тканей к инсулину оценивали с помощью индекса чувствительности к инсулину НОМА как отношение концентраций инсулина и глюкозы натощак по формуле [инсулин×глюкоза]/22,5. Инсулинорезистентность (ИР) фиксировали при значениях индекса HOMA-R>2,77 [12]. Чувствительность тканей к лептину оценивали по индексу свободного лептина (FLI) – отношения концентрации лептина (нг/мл) к концентрации растворимого рецептора к лептину (нг/мл). Лептинорезистентность фиксировали при FLI >25 по показателям сыворотки крови [13].

Анализ в подгруппах

В 1-ю группу вошли 54 пациента с висцеральным ожирением (ВО), во вторую группу включены 30 человек без ВО (табл. 1). В контрольную группу были включены 30 мужчин без ССЗ, средний возраст которых (58,42 (52,2;71,1) лет) был сопоставим с пациентами, вошедшими в исследование (р=0,64). По данным антропометрических обследований, среди здоровых добровольцев не было лиц с избыточной массой тела и ожирением, ОТ соответствовал гендерной норме (менее 94 см), ОТ/ОБ было менее 1,0.

По результатам антропометрии ИМТ у пациентов с ВО был статистически значимо ниже, чем у пациентов без ВО (табл. 1). Количество больных с нормальной массой тела среди пациентов с ВО составило 39%, а среди пациентов без ВО – только у 20% больных (р=0,02). Избыточная масса регистрировалась у 37,0% и 47% соответственно среди больных с ВО и без ВО. Диагноз ожирения был верифицирован у 33% пациентов без ВО (против 24% у больных с ВО, р=0,03). Для пациентов с ВО было характерно перераспределение жировой ткани по андроидному типу. Так, индекс ОТ/ОБ более 1,0 регистрировался у всех пациентов с ВО, тогда как при отсутствии ВО – только у трети пациентов (р<0,05).

Таблица 1. Основные антропометрические характеристики больных ИБС

Р – достигнутый уровень значимости

Пациенты исследуемых групп были сопоставимы по возрасту, наличию факторов риска ССЗ, таких как артериальная гипертензия, курение, стенокардия, дислипопротеинемия, застойная хроническая сердечная недостаточность и инфаркт миокарда в анамнезе (р>0,05). Пациенты, включенные в исследование, получали стандартную антиангинальную и антиагрегационную терапию.

Этическая экспертиза

Данное исследование одобрено локальным этическим комитетом НИИ (выписка из протокола №30 от 10.10.2015 г.).

Статистический анализ

Размер выборки предварительно не рассчитывался. Статистическую обработку результатов осуществляли c использованием пакета прикладных программ STATISTICA 6.1. Для оценки вида распределения использовали тест Колмогорова–Смирнова. Для сравнения независимых групп с распределением признаков, отличных от нормального, использовали U-критерий Манна–Уитни. Для исследования зависимостей между переменными использовался коэффициент ранговой корреляции Спирмена. Результаты представлены в виде медианы (Mе) и значений 25-го и 75-го квартилей (Me Q1;Q3). Статистически значимыми считали различия при p<0,05.

Результаты исследования

Результаты определения концентрации адипокинов и цитокинов в культуре адипоцитов ЭЖТ и ПЖТ у больных с ВО и ИБС представлены в табл. 2. Установлено, что содержание лептина в культуре адипоцитов ЭЖТ было существенно выше и на 1-е сутки инкубации составило 140%, а на 2-е сутки – 180% по сравнению с адипоцитами ПЖТ. Концентрация SOB-R в эпикардиальных адипоцитах возрастала еще больше, в 2,3 раза, по сравнению с ПЖТ. При этом FLI в адипоцитах ПЖТ на 1-е и 2-е сутки был выше соответственно в 1,7 раза и 1,3 раза по сравнению с эпикардиальными адипоцитами. Более высокий коэффициент свободного лептина, т.е. увеличение его концентрации при низком SOB-R, является подтверждением наличия лептинорезистентности в адипоцитах ПЖТ по сравнению с эпикардиальными адипоцитами.

Таблица 2. Содержание адипокинов и цитокинов в культуре адипоцитов эпикардиальной и подкожной жировой ткани больных ИБС на фоне висцерального ожирения, Ме (25;75)

Р – достигнутый уровень значимости

В отличие от увеличения лептина содержание протективного адипонектина в адипоцитах ЭЖТ снижалось на 20–25% по сравнению с адипоцитами ПЖТ. Для оценки дисбаланса лептин-адипонектинового метаболизма рассчитывали коэффициент отношения их концентраций. В эпикардиальных адипоцитах коэффициент отношения концентрации лептина к адипонектину составил 185% и 229% соответственно на 1-е и 2-е сутки инкубации по сравнению с коэффициентом в адипоцитах ПЖТ.

Кроме того, в адипоцитах ЭЖТ выявлен дисбаланс про- и антивоспалительных цитокинов (табл. 2). Содержание провоспалительных цитокинов, ФНО-α и ИЛ-1 было статистически значимо выше, в то время как концентрация антивоспалительного, протективного ИЛ-10 была ниже в ЭЖТ и составила всего 39% и 49% соответственно на 1-е и 2-е сутки инкубации по сравнению с адипоцитами ПЖТ. Показатель дисбаланса про- и антивоспалительных цитокинов (отношение ИЛ-1β/ИЛ-10) в культуре адипоцитов ЭЖТ был более чем в 2,5 раза выше по сравнению с показателем в ПЖТ.

Таким образом, по адипокиново-цитокиновому профилю адипоциты ЭЖТ и ПЖТ отличаются между собой. Адипоциты ЭЖТ при ИБС на фоне ВО характеризуются увеличением ИЛ-1, ФНО-α, лептин-адипонектинового отношения и снижением содержания протективных факторов: адипонектина и антивоспалительного цитокина ИЛ-10. В адипоцитах ПЖТ выявлена лептинорезистентность, а увеличение провоспалительных цитокинов компенсировано возрастанием концентрации ИЛ-10.

При выполнении исследования предполагалось, что адипокины и цитокины, синтезируемые адипоцитами ЭЖТ на фоне ВО в кровь, являются факторами риска развития сердечно-сосудистой патологии. В результате оценки параметров адипокинового баланса в сыворотке крови больных ИБС (табл. 3) выявлено, что при ВО уровень лептина был в 1,67 раза выше, а концентрация SOB-R – на 32% ниже по сравнению с группой без ВО. Факт наличия лептинорезистентности подтверждался FLI, который при ВО был выше в 2,7 раза по сравнению с пациентами без ВО. Концентрация адипонектина в сыворотке крови больных с ВО, напротив, была на 27,6% ниже, чем у пациентов без ВО.

Таблица 3. Содержание адипокинов и цитокинов в сыворотке крови больных ИБС в зависимости от наличия висцерального ожирения, Ме (25;75)

Р – достигнутый уровень значимости

При оценке воспалительного статуса установлено, что концентрация ФНО-α и ИЛ-1β в сыворотке крови у лиц с ВО превышала значения лиц без ВО в 1,5 и 2,0 раза соответственно. А уровень провоспалительного ИЛ-10 был в 2 раза ниже у пациентов с ВО по сравнению с больными, у которых отсутствовало ВО. При проведении корреляционного анализа была выявлена положительная взаимосвязь между содержанием лептина, ФНО, ИЛ-10 в адипоцитах и сыворотке крови, с коэффициентами корреляции, соответственно равными 0,43 (р=0,04); 0,53 (р=0,02) и 0,50 (р=0,04). В целом динамика концентрации лептина, адипонектина, ФНО-α, ИЛ-1 и ИЛ-10 в сыворотке крови и адипоцитах ЭЖТ имеет одинаковую направленность и выражается увеличением патогенных факторов на фоне дефицита протективных адипоцитокинов.

Выраженный адипокиново-цитокиновый дисбаланс адипоцитов и сыворотки крови с диспропорцией в сторону усиления секреции маркеров воспаления и развития лептинорезистентности в группе пациентов с ВО был тесно ассоциирован со степенью атеросклеротического поражения сосудов и развитием кардиоваскулярных осложнений.

По результатам ангиографического исследования и цветного дуплексного сканирования среди пациентов с ВО достоверно чаще регистрировалось атеросклеротическое поражение нескольких бассейнов со стенозами от 30% до 50% (рис. 1). Кроме того, при ВО преобладало поражение трех и более коронарных сосудов. В этой же группе чаще регистрировались стенокардия 2, 3 функционального класса (ФК) (100% больных против 63%). Отягощенная наследственность по ИБС выявлена у 85% больных с ВО и у 54% пациентов без ВО (р=0,04), по сахарному диабету – у 26% и 10% больных (р=0,04) соответственно.

Рис. 1. Количество больных с атеросклеротическими поражениями коронарных артерий при ИБС

Следует отметить, что дисбаланс патологических и защитных факторов адипокиново-цитокинового профиля у больных с ВО сопровождался более выраженным нарушением липидного и углеводного обмена по сравнению с пациентами, не имеющими ВО. Обнаружено, что в сыворотке крови больных ИБС на фоне ВО статистически значимо возрастала концентрация атерогенных показателей липидного обмена (ХС-ЛПНП, ХС-ЛПОНП, Апо-В, ТАГ, Апо-В/Апо-А1 – в 1,32 раза, ИА, СЖК) и снижалось содержание антиатерогенных фракций ХС-ЛПВП и Апо-А1 относительно пациентов без ВО (рис. 2).

Рис. 2. Показатели липидного обмена больных ИБС в зависимости от наличия висцерального ожирения

При ВО у больных ИБС были более выражены изменения углеводного обмена (рис. 3), в частности увеличение индекса НОМА в 1,5 раза и наличие ИР по сравнению с пациентами, не имеющими ВО. Кроме того, для пациентов с ВО характерна гиперинсулинемия, возрастание концентрации С-пептида по сравнению с больными, у которых не было ВО. Концентрация глюкозы и гликированного гемоглобина существенно не отличалась (р>0,05).

Рис. 3. Показатели углеводного обмена больных ИБС в зависимости от наличия висцерального ожирения

В целом у больных с ВО наблюдались более выраженные изменения адипокиново-цитокинового профиля в сыворотке крови и жировой ткани. При этом изменения метаболизма не зависели от степени развития подкожной жировой клетчатки. Среди пациентов с ВО присутствовали лица с нормальным ИМТ, и в то же время у пациентов с высоким ИМТ и ожирением II и III степени не было выявлено ВО. В отличие от ПЖТ, площадь ВЖТ определяла более высокие значения концентрации лептина, ФНО-α в адипоцитах и сыворотке крови, показателей липидного и углеводного обмена (положительные коэффициенты корреляции) и более низкое содержание SOB-R (отрицательные коэффициенты корреляции, табл. 4). С площадью ПЖТ были связаны только два показателя сыворотки крови: адипонектин (r=0,47, р=0,03) и рецептор к лептину (r=-0,36, р=0,03).

Таблица 4. Коэффициенты корреляции (r) показателей адипоцитов и сыворотки крови с площадью висцеральной жировой ткани

Таким образом, при ИБС на фоне ВО адипоциты ЭЖТ характеризуются усилением секреции лептина, его рецептора, провоспалительных цитокинов и снижением секреции адипонектина и ИЛ-10 по сравнению с адипоцитами ПЖТ. Дисбаланс адипокино-цитокинового статуса больных ИБС с ВО сопровождается выраженным атеросклеротическим поражением коронарных артерий, стенокардией 2 и 3 ФК, возрастанием атерогенных фракций липидов, лептино- и инсулинорезистентностью.

Обсуждение

Ожирение является одним из основных факторов риска сердечно-сосудистой патологии, при этом висцеральной форме ожирения принадлежит наибольший кардиоваскулярный риск. Известно, что у лиц с нормальной массой тела при наличии ВО кардиоваскулярный риск повышается в 2,75 раза, а риск смерти от всех причин увеличивается в 2,08 раза по сравнению с лицами, у которых отсутствует ВО [14].

Висцеральная жировая ткань (ВЖТ) является активным эндокринным органом, в котором синтезируется целый ряд адипокинов, регуляторов липидного и углеводного обмена и цитокинов, вовлекающихся в процесс атерогенеза. Кроме того, ВЖТ обладает необычными метаболическими особенностями. Известно, что в висцеральных адипоцитах повышена экспрессия и функциональная активность β3-адренорецепторов и снижено число рецепторов к инсулину, что приводит к более интенсивному метаболизму липидов по сравнению с другими жировыми депо. Накопление недоокисленных метаболитов СЖК и церамидов может стимулировать развитие липотоксических расстройств, конечным результатом которых являются: ИР, дислипидемия, кардиомиопатия и повышение АД [15].

Среди ВЖТ особое значение может иметь жировая ткань эпикардиальной локализации. ЭЖТ является уникальным и многогранным жировым депо с местными и системными эффектами, толщина и метаболическая активность которой напрямую зависят от объема ВЖТ [16]. Также толщина эпикардиального жира напрямую коррелирует с тяжестью поражения коронарных артерий при ИБС и толщиной миокарда левого желудочка [17].

С учетом того, что ВО является неблагоприятным фактором развития патологии сердца, основное внимание в настоящем исследовании было уделено адипокино-цитокиновому профилю адипоцитов и сыворотки крови больных ИБС на фоне ВО. Были исследованы адипоциты эпикардиальной и ПЖТ. Показано, что адипоциты ЭЖТ характеризуются более высокой концентрацией лептина на фоне снижения содержания адипонектина по сравнению с адипоцитами ПЖТ (см. табл. 2). Увеличение концентрации лептина в адипоцитах ПЖТ и ЭЖТ находилось в прямой зависимости от его концентрации в сыворотке крови. Однако, в отличие от адипоцитов, в сыворотке крови повышение содержания лептина протекало на фоне снижения его SOB-R. Увеличение секреции лептина на фоне снижения концентрации его рецептора может являться проявлением лептинорезистентности [18]. При этом наиболее выраженные изменения в сыворотке проявлялись при наличии ВО.

Анализируя результаты изучения цитокинового профиля адипоцитов, можно заключить, что при ИБС существенное значение имеет активация воспаления в адипоцитах ЭЖТ больных с ВО, где увеличение ФНО-α, ИЛ-1 и ИЛ-6 сопровождается снижением антивоспалительного цитокина ИЛ-10. С учетом способности провоспалительных цитокинов модулировать синтез и секрецию адипокинов активация воспаления может быть фактором увеличения содержания лептина и угнетения протективного адипонектина в адипоцитах ЭЖТ. Однако патологическое влияние лептина в адипоцитах ЭЖТ может быть скомпенсировано увеличением растворимого рецептора лептина, который может связывать избыток лептина. В адипоцитах ПЖТ активация воспаления контролируется высоким содержанием ИЛ-10, а увеличение лептина сочетается с высоким содержанием адипонектина. Разная реакция адипокинов в ЭЖТ и ПЖТ проявляется в противоположной реакции растворимого рецептора лептина, концентрация которого увеличивается в ЭЖТ и снижается в ПЖТ. Снижение концентрации растворимого рецептора лептина и адипонектина связано с увеличением площади ВЖТ и может рассматриваться как фактор формирования лептинорезистентности.

Локальный и системный дисбаланс адипокинового и цитокинового профиля при ВО сочетается с наличием атеросклероза, многососудистого поражения коронарных артерий нескольких бассейнов со стенозами от 30% до 50%, стенокардией 2 и 3 ФК возрастанием атерогенных фракций липидов сыворотки крови, инсулинорезистентностью. По-видимому, вырабатываемые адипокины и цитокины попадают непосредственно в коронарный кровоток благодаря анатомической близости ЭЖТ к коронарным сосудам, что может иметь неблагоприятные последствия. Известно, что интраартериальное введение ФНО-α сопровождается развитием эндотелий-зависимой вазодилятации и инициации воспаления в сосудистой стенке [19]. Проатерогенный эффект ФНО-α также включает промоцию миграции лейкоцитов к эндотелию, увеличение синтеза молекул адгезии и хемоаттрактантов, усиление капиллярной проходимости [20].

Заключение

Таким образом, при ИБС на фоне ВО состояние адипоцитов ЭЖТ характеризуется как «метаболическое воспаление» и может свидетельствовать о непосредственном вовлечении адипоцитов в патогенез ИБС за счет формирования адипокинового дисбаланса и активации провоспалительных реакций. Определение коэффициентов ИЛ-1/ИЛ-10, лептин/адипонектин и содержания растворимого рецептора лептина можно использовать при оценке адипокино-цитокинового дисбаланса при ИБС, протекающей на фоне ВО.

Дополнительная информация

Источник финансирования

Работа выполнена в рамка темы НИР «Мультифокальный атеросклероз и коморбидные состояния. Особенности диагностики, управления рисками в условиях крупного промышленного региона Сибири» № госрегистрации АААА-А16-116011910161-2 от 19.01.2016.

Конфликт интересов

Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Информация о вкладе каждого автора

Груздева О.В. – концепция и дизайн исследования, анализ полученных данных, написание текста; Бородкина Д.А. – анализ полученных данных, написание текста; Акбашева О.Е. – анализ полученных данных, написание текста; Дылева Ю.А. – сбор и обработка материалов; Антонова Л.В. – сбор и обработка материалов; Матвеева В.Г. – сбор и обработка материалов; Иванов С.В. – сбор и обработка материалов; Учасова Е.Г. – Сбор и обработка материалов; Белик Е.В. – сбор и обработка материалов; Фанаскова Е.В. – сбор и обработка материалов; Каретникова В.Н. – концепция и дизайн исследования; Коков А.Н. – сбор и обработка материалов; Барбараш О.Л. – концепция и дизайн исследования.