клинический аспирант отдела терапевтической эндокринологии
д.м.н., проф., член-корр. РАН, заведующая отделом терапевтической эндокринологии
к.м.н., в.н.с. отдела терапевтической эндокринологии
сотрудник группы генетических исследований
руководитель группы генетических исследований
к.м.н., доцент кафедры госпитальной терапии и эндокринологии
к.б.н., руководитель лаборатории молекулярно-генетической диагностики
клинический аспирант отдела терапевтической эндокринологии
Цель: изучить влияние полиморфизма генов SERT и GNB3 на результаты лечения ожирения на примере препарата обратного захвата серотонина и норадреналина
Материалы и методы: В рамках программы ПримаВера были отобраны пациенты с ожирением, которые не достигли 5% снижения массы тела от исходной в течение 3-х месяцев терапии Редуксином (сибутрамин+МЦК) в дозе 10 мг (группа 1). Для оценки взаимосвязи динамики массы тела с различными генетическими полиморфизами была сформирована вторая группа пациентов, достигших клинически значимого снижения массы тела, статистически сопоставимая по численности, возрасту и ИМТ (группа 2). В исследование было включено 66 пациентов (57 ж и 9 м), средний возраст 39,29 ± 12,64 лет. Клиническое обследование и определение биохимических показателей проводилось исходно и по окончании периода наблюдения. Для оценки типа пищевого поведения (ПП) и выявления скрытых депрессий использовались валидизированные опросники. Также проведено генетическое исследование по оценке полиморфизма генов SERT и GBN3.
Результаты: В группе 2 наличие аллеля S SERT-гена достоверно связано с более высокими показателями экстернального типа ПП. Статистически значимой зависимости между генотипом либо аллелем и массой тела, показателями АД, пульса и холестерина получено не было. При этом в группе 1 отмечалась статистически значимая ассоциация носительства S-аллеля с меньшей потерей массы тела -2,8 кг и более высокими показателями глюкозы в начале исследования 5.38±0.63 ммоль/л (в сравнении с L-аллелем -3,28 кг и 5,04±0,91 ммоль/л соответственно).
При исследовании полиморфизма GBN3 в группе 2 у носителей генотипа сс определялись более высокие показатели САД до начала лечения (129,27±9,16 мм рт.ст.), САД и ДАД по окончании наблюдения (127,36±8,16 и 78,36±4,3 мм рт.ст.) в сравнении с генотипом CT (117,27±12,5; 115,45±10,6; 72,91±6,0 мм рт.ст., соответственно) (р<0,05). Также среди носителей аллеля С были выявлены более тяжелые проявления депрессивного синдрома в сравнении с носителями аллеля T.
Выводы: Носительство генотипа сс гена GBN3 определяет более высокие показатели АД, как исходно, так и на фоне терапии Редуксином, а также более выраженные проявления депрессивного синдрома. Среди носителей S-аллеля гена SERT потеря массы тела на фоне лечения Редуксином была ниже, чем среди носителей L-аллеля.
Aim. To study the influence of SERT and GNB3 gene polymorphisms on the results of the treatment of obesity by serotonin-norepinephrine reuptake inhibitors.
Methods. Patients who didn’t achieve significant weight loss in 3 month period during PrimaVera Study were selected for the genetic evaluation and compared with the group of “effective treatment”. The study included 66 patients (57 females and 9 males), mean age 39.29 ± 12.64 years, who received Reduxin (sibutramine + MCC) at the dose of 10 mg. Term follow-up was 3 months. Clinical examination and determination of biochemical parameters was performed at baseline and at the end of the observation period. In order to assess the type of eating behavior and identify hidden depressions a validated questionnaire was used (questionnaire "The types of eating disorders» (DEBQ), Beck Depression Scale). Also conducted a genetic study to assess SERT and GBN3 gene polymorphisms.
Results. In the second group presence of S-allele SERT-gene was significantly associated with higher rates of external type of eating behavior. A statistically significant correlation between the genotype or allele of either body weight, rates of blood pressure, heart rate and cholesterol have not been found. In the first group there was a statistically significant association of S-allele carrier with less weight loss -2.8 kg (compared to l-allele) and higher rates at baseline glucose 5.38 ± 0.63 mmol / l (compared to L-allele of -3.28 kg and 5.04 ± 0.91 mmol / l).
In the study of GBN3 polymorphism in the second group among CC genotype carriers there were higher levels of systolic blood pressure (SBP) before treatment (129.27 ± 9.16 mmHg), SBP and diastolic blood pressure after 3 months of treatment (127.36 ± 8.16 and 78.36 ± 4.3 mmHg) compared with CT genotype (117.27 ± 12.5; 115.45 ± 10.6; 72.91 ± 6.0 mm Hg, respectively) (p <0.05). Also among the carriers of C-allele there were more severe manifestations of depressive syndrome in comparison with T-allele carriers.
Conclusion. Among the carriers of S-allele of SERT gene body weight loss during Reduxin treatment was lower than among the carriers of the L-allele; among the carriers of CC genotype of GBN3 gene higher blood pressure was higher at baseline and during Reduxin treatment, as well as more severe symptoms of a depressive syndrome.
В настоящее время ожирение рассматривается как хроническое заболевание, в патогенезе которого участвуют генетические, психологические и экологические факторы.
Центральные механизмы регуляции пищевого поведения реализуются в гипоталамусе и стволовых структурах мозга за счет интеграции различных периферических сигналов при помощи нейротрансмиттеров и построения соответствующих нейронных цепей [
При ожирении, безусловно, имеют место повреждения дофаминергических и серотонинергических сигнальных путей в головном мозге, однако эти нарушения обмена нейромедиаторов могут являться как причиной ожирения, так следствием метаболических нарушений, развивающихся при ожирении. В головном мозге серотонин синтезируется преимущественно в «ядрах шва», восходящие терминали которых заканчиваются во многих подкорковых образованиях, в том числе в гипоталамусе и лимбической системе. Эффекты серотонина реализуются через его рецепторы, которых в настоящее время выделено более 14 вариантов, объединенных в 4 семейства [
Использование в терапии ожирения СИОЗС обусловливает важность понимания физиологической роли SERT, а полиморфизмы кодирующего его гена могут дать ответ на причины разной эффективности данной группы препаратов.
Другим важным геном, участвующим в регуляции пищевого поведения, является GNB3, кодирующий гуанин-нуклеотидсвязывающий белок бета-3 (GNB3), бета-субъединицу G-белка, и расположенный на хромосоме 12 (12p13.31). G-белки играют ключевую роль в молекулярной сигнализации, обеспечивая в организме передачу сигнала между рецепторами и эффекторными белками, увеличивая внутриклеточную концентрацию ионов кальция (Ca+2) [4, 5]. Полиморфизм гена GNB3 заключается в точечной замене оснований цитозина (С) на тимин (Т) в 10-м экзоне. В результате альтернативного сплайсинга аллеля Т теряется 498–620 нуклеотидов в 9-м экзоне, и это приводит к укорочению синтезируемого белка, изменению его активности и нарушениям в передаче внутриклеточных сигналов.
Полиморфизм C825T в целом ряде исследований был ассоциирован с увеличением частоты АГ. В частности, в исследовании Danovitz M. et al. [
В связи с тем, что ожирение зачастую связано с изменением функциональной организации гипоталамуса или прочих нервных центров, отвечающих за пищевое поведение, а также с нарушением метаболизма некоторых нейромедиаторов, патогенетически обоснованным является назначение подобным пациентам препаратов центрального действия. К таким препаратам относится Редуксин (сибутрамин+МКЦ), представляющий собой ингибитор обратного нейронального захвата серотонина и норадреналина. В крупномасштабной наблюдательной программе «ПримаВера» было показано, что 92,5% пациентов достигают клинически значимого снижения массы тела на 5% и более за три месяца терапии [
Поэтому целью нашего исследования явилось изучение роли полиморфизма генов SERT и GNB3 в прогнозировании результатов лечения ожирения препаратами обратного захвата серотонина и норадреналина (Редуксин®).
В ходе клинической практики наблюдения за пациентами с ожирением в рамках программы «ПримаВера» были отобраны пациенты, которые не достигли клинически значимого снижения массы тела на 5% в течение 3 месяцев терапии (далее группа 1). Для оценки взаи мосвязи динамики массы тела с различными генетическими полиморфизмами была сформирована вторая группа, статистически сопоставимая по численности, возрасту и ИМТ (далее группа 2), пациенты которой за 3 месяца терапии продемонстрировали клинически значимое снижение массы тела на 5% и более. Клиническая характеристика групп представлена в таблице 1.
Таблица 1. Клинические характеристики 2 групп пациентов до начала терапии Редуксином (данные представлены в виде среднего значения показателей и 95% доверительного интервала) | ||||
1 группа (N=39) | 2 группа (N=27) | |||
М (среднее) | 95% ДИ | М (среднее) | 95% ДИ | |
Возраст, лет | 38,46 | 34,05–42,88 | 40,48 | 36,04–44,92 |
Рост, см | 1,66 | 1,64–1,69 | 1,65 | 1,62–1,67 |
Масса тела, кг | 104,59 | 99,65–109,53 | 98,15 | 93,61–102, 68 |
Индекс массы тела (ИМТ), кг/м2 | 37,60 | 36,58–38,62 | 36,25 | 34,80–37,71 |
Систолическое артериальное давление (САД), мм рт.ст. | 124,85 | 120,32–129,37 | 122,59 | 117,77–127,41 |
Диастолическое артериальное давление (ДАД), мм рт.ст. | 78,95 | 76,34–81,55 | 78,15 | 74,85–81,45 |
Частота сердечных сокращений (ЧСС), ударов в мин. | 73,77 | 71,53–76,01 | 70,19 | 67,41–72,96 |
Общий холестерин (ОХС), ммоль/л | 5,33 | 4,91–5,75 | 4,97 | 4,60–5,33 |
Липопротеиды низкой плотности (ЛПНП), ммоль/л | 3,43 | 3,07–3,79 | 2,98 | 2,69–3,28 |
Триглицериды (ТГ), ммоль/л | 1,80 | 1,45–2,14 | 1,38 | 1,17–1,59 |
Липопротеиды высокой плотности (ЛПВП), ммоль/л | 1,11 | 1,00–1,22 | 1,17 | 1,04–1,31 |
Глюкоза, ммоль/л | 5,26 | 5,01–5,50 | 5,16 | 4,95–5,37 |
Инсулин, мкЕд/мл | 32,13 | 24,96–39,30 | 24,26 | 18,73–29,79 |
Экстернальный тип пищевого поведения | 23,46 | 20,79–26,13 | 24,93 | 21,86–27,99 |
Эмоциогенный тип пищевого поведения | 23,79 | 20,88–26,71 | 24,89 | 21,01–28,77 |
Ограничительный тип пищевого поведения | 22,92 | 18,62–27,23 | 18,67 | 13,67–23,66 |
Шкала Бека | 8,49 | 6,81–10,16 | 10,70 | 8,86–12,55 |
В данной статье представлены промежуточные результаты наблюдения.
В исследование было включено 66 пациентов (57 женщин и 9 мужчин), средний возраст 39,29±12,64 лет, которые получали Редуксин (сибутрамин+МЦК) с целью лечения ожирения в дозировке 10 мг. Срок наблюдения составил 3 мес. Всем пациентам проводилось физикальное и биохимическое обследование в начале периода наблюдения и по его окончанию, анкетирование пациентов по валидизированным опросникам для оценки типа пищевого поведения (Опросник «Типы нарушения пищевого поведения» (DEBQ)) и выявления скрытых депрессий (шкала депрессии Бека), также на базе лаборатории «Лагис» проведено генетическое исследование по оценке полиморфизмов генов SERT и GBN3. Выделение геномной ДНК из цельной крови проводилось с использованием набора реагентов «К-Сорб». Генотипирование варьирующих по числу тандемных повторов (ВЧТП, VNTR) полиморфизма 5'-HTTLPR гена SERT и однонуклеотидных полиморфизмов (ОНП, SNP) rs5443, C825T (Ser274Ser) гена GNB3 проводили методом ПЦР.
Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом. До включения в исследование у всех пациентов было получено письменное информированное согласие. Статистическая обработка данных проводилась при помощи программы StatSoft STATISTICA 10.0.1011.0. Данные представлены в виде среднего значения показателей и 95% доверительного интервала (mean; 95% ДИ) или в виде среднего значения показателей и стандартного отклонения (mean±SD). Статистическую значимость различий показателей до начала лечения и через 3 месяца терапии оценивали с помощью критерия Вилкоксона, различия между группами в зависимости от распределения по генотипу – с помощью критериев Манна-Уитни (для двух вариантов генотипа) и Краскела-Уоллиса (для трех вариантов генотипа). Критический уровень значимости (р) при проверке статистических гипотез принимался равным 0,05.
В ходе анализа данных группы разделились следующим образом: в 1-ю группу (недостаточный ответ на терапию) вошли 39 пациентов, во 2-ю группу (высокий ответ на терапию) – 27 пациентов.
В группе 2 отмечено достоверное снижение массы тела в ходе наблюдения на 11,59 (95% ДИ 8,95–14,23) кг (22,33%, р<0,05), снижение уровня ДАД на 2,81 (95% ДИ 0,77–4,86) мм рт.ст. (3,21%, р<0,05), снижение САД составило 1,44 (95% ДИ 0,12–2,77) мм рт.ст. (1,07%), однако оно не было достоверным (р>0,05). Динамика показателей частоты пульса также была недостоверна. При исследовании биохимических показателей также была отмечена положительная динамика по истечении периода наблюдения. Среди всех пациентов было зафиксировано 6 случаев побочных эффектов – 3 случая бессонницы, 2 случая тошноты, 1 случай сухости во рту; ни один из них не явился причиной прерывания терапии.
В первой группе, несмотря на то, что клинически значимый порог снижения массы тела не был достигнут (среднее снижение массы тела в группе составило 3,57 %), изменения массы тела были статистически значимыми – на 2,4 кг (95% ДИ 2,05–2,74), р<0,05. Как и во второй группе, не было выявлено достоверного статистически значимого изменения показателей САД и ЧСС. Динамика показателей клинического исследования показана в таблице 2.
Таблица 2. Динамика показателей исследования до и через 3 мес после лечения (данные представлены в виде среднего значения динамики показателей и 95% доверительного интервала) | ||||
1 группа (N=39) | 2 группа (N=27) | |||
mean/95% CI | р | mean/95% CI | р | |
Систолическое артериальное давление (САД), мм рт.ст. | -0,74 ((-2,15)–0,67) | NS | 1,44 (0,12–2,77) | NS |
Диастолическое артериальное давление (ДАД), мм рт.ст. | 1,03 (0,32–1,73) | 0,01 | 2,8 (0,77–4,86) | 0,00 |
Частота сердечных сокращений (ЧСС), ударов в мин. | 0,23 ((-0,78)–1,24) | NS | 0,3 ((-0,8)–1,39) | NS |
Общий холестерин (ОХС), ммоль/л | 0,29 (0,12–0,45) | 0,00 | 0,48 (0,21–0,75) | 0,00 |
Липопротеиды низкой плотности (ЛПНП), ммоль/л | 0,36 (0,2–0,52) | 0,00 | 0,53 (0,34–0,72) | 0,00 |
Триглицериды (ТГ), ммоль/л | 0,13 ((-0,05)–0,3) | NS | 0,17 (0,05–0,28) | 0,00 |
Липопротеиды высокой плотности (ЛПВП), ммоль/л | -0,1 ((-0,19)–(-0,01)) | 0,03 | -0,23 ((-0,35)–(-0,12)) | 0,00 |
Глюкоза, ммоль/л | 0,07 ((-0,04)–0,18) | NS | 0,3 (0,16–0,45) | 0,00 |
Инсулин, мкЕд/мл | 3,49 ((-9,1)–12,26) | 0,01 | 4,0 (0,98–7,0) | 0,03 |
NS – недостоверно
Также нами была изучена взаимосвязь полиморфизмов гена SERT генотипы LL, SL, SS и гена GBN3 генотипы CC, CT, TT.
В группе 2 наличие аллеля s SERT-гена достоверно связано с более высокими показателями экстернального типа ПП – аллель L – 18,6±7,86; аллель S – 27,11±15,6. Статистически значимой зависимости между генотипом либо аллелем и массой тела, показателями АД, пульса и холестерина получено не было. При этом в группе 1 отмечалась статистически значимая ассоциация носительства s-аллеля (SS- и SL-генотипы) с меньшей потерей веса -2,8 кг (в сравнении с L-аллелем -3,28 кг) и более высокими показателями глюкозы в начале исследования 5,38±0,63 ммоль/л (в сравнении с L-аллелем 5,04±0,91 ммоль/л).
При исследовании полиморфизма GBN3 в группе 2 показано статистически значимое различие различных генотипов и показателей САД до начала терапии, при этом при сравнении групп между собой генотип сс показал более высокие показатели САД до начала лечения (129,27±9,16 мм рт.ст.), САД после 3 месяцев лечения (127,36±8,16 мм рт.ст.) и ДАД после 3 месяцев лечения (78,36±4,3) в сравнении с генотипом CT (117,27±12,5; 115,45±10,6; 72,91±6,0 мм рт.ст. соответственно) (р<0,05). Сравнение с генотипом TT не выявило значимых различий. Также среди носителей аллеля с (генотипы СС+CT) были выявлены более тяжелые проявления депрессивного синдрома в сравнении с носителями аллеля t (средний балл по шкале Бека 11,68±4,3 и 6,4±4,0 соответственно), а также более высокие показатели триглицеридов как до, так и после проведенного лечения (1,5±0,51; 1,28±0,38 ммоль/л и 0,87±0,3; 0,93±0,25 ммоль/л соответственно). Различий по показателям массы тела получено не было.
В группе 1, где не наблюдалось достаточного снижения массы тела, тем не менее была выявлена статистически значимая ассоциации генотипа и исходной массы тела р=0,03, а также при сравнении генотипов попарно – генотип СС ассоциирован с более высоким весом как в начале наблюдения – 110,14±11,48 кг, так и в конце 106,29±10,99 кг (генотип ct соответственно 100,41±15,93 кг и 98,0±15,41 кг).
Таким образом, в ходе проведенного наблюдения показана высокая эффективность препарата наряду с высоким уровнем безопасности. Отдельно стоит отметить динамику снижения артериального давления даже у пациентов, не продемонстрировавших высокий уровень ответа на терапию сибутрамином. Аналогичные данные получены в ходе проведения всероссийской наблюдательной программы «ПримаВера» [13, 14]. Нами показана достоверно более высокая эффективность терапии у пациентов с носительством L-аллеля гена SERT. Полученные данные схожи с проведенными ранее исследованиями.
Несмотря на представленные данные в мировой литературе по ассоциации 825T аллеля с более высокими рисками развития гипертонической болезни, а также инсульта и инфаркта миокарда [
The authors declare that there are no conflicts of interest present.